薄層色譜法是一種基於使用厚度為 0.1-0.5 毫米的吸附劑層作為固定相的化學分析方法。 TLC 方法可用於各種領域，並可測定多種化合物。
方法原理
薄層色譜法起源於紙色譜法，最早的實驗是在 19 世紀 80 年代進行的。這種分析的積極使用是在 1938 年之後才開始的。
TLC 技術包括流動相（洗脫液）、固定相（吸附劑）和分析物。固定相被施加並固定在一個特殊的板上。該板可以由玻璃、鋁或塑料製成 - 這些是可重複使用的基材，每次使用後必須徹底清洗、乾燥並準備好使用吸附劑。也可以使用使用後丟棄的紙盤。
矽膠最常用作固定相，但也可以使用其他吸附劑，例如氧化鋁。使用這種或那種吸附劑時，必須嚴格遵守技術以確保結果準確，例如，因為如果實驗室中的空氣太潮濕，矽膠可能會給出錯誤的結果。
溶劑用作流動相，例如，水、乙酸、乙醇、丙酮、苯。必須負責任地選擇溶劑，因為色譜結果直接取決於其質量（粘度、密度、純度）。為每個分析的樣品選擇單獨的溶劑。
分析
樣品必須在溶劑中稀釋。如果沒有發生完全溶解並且殘留過多雜質，則可以通過萃取清潔樣品。
可以自動或手動地將樣品施加到板上。自動應用使用微噴方法，其中將每個樣品噴到基材的適當區域上。對於手動應用，使用微量移液器。為每個樣品在板上放置鉛筆標記。每個樣品都用毛細管以一條線施加到板上，距離標記足夠遠，以免與鉛中的碳發生反應。
將板置於容器中，在容器底部倒入洗脫液。將支撐物的一側放入容器中直至標記線。容器緊密封閉以避免流動相蒸發。在毛細管力的作用下，洗脫液開始上升到吸附劑層。當洗脫液達到一定水平時，將板從容器中取出並乾燥。
如果所需物質沒有顏色，則它在基材上將不可見。因此，執行可視化 - 用碘蒸氣或其他染料處理板。
在這樣的處理之後，評估結果。吸附劑上出現不同強度的彩色區域。為了確定一種物質（或一組物質），將著色區域、它們的大小、強度和流動性與參考樣品進行比較。
TLC 方法因其快速、廉價、準確、直觀、不需要復雜設備且易於解釋而被廣泛使用。